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在選擇大鼠ELISA試劑盒時,需要考慮以下幾個關鍵因素

瀏覽次數(shù):203發(fā)布日期:2025-01-10
  大鼠ELISA試劑盒是一種廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷的實驗工具,它通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術來檢測和定量分析大鼠體內特定蛋白質的表達水平。
 
  大鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法進行酶聯(lián)免疫吸附試驗。具體步驟如下:
 
  1.包被:將特異性抗體(如大鼠白細胞介素1β捕獲抗體)預先包被在微孔板中。
 
  2.加入樣本和標準品:依次加入待測樣本、標準品以及HRP標記的檢測抗體。
 
  3.溫育與洗滌:經過一定時間的溫育后,洗滌以去除未結合的成分。
 
  4.顯色反應:加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺),TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺與樣品中的特定蛋白質含量呈正相關。
 
  5.讀數(shù)與分析:用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品濃度。
 
  在選擇大鼠ELISA試劑盒時,需要考慮以下幾個關鍵因素:
 
  1.蛋白濃度:通過NCBI、uniprot等數(shù)據(jù)庫查找待測樣本的蛋白表達量參考值,與試劑盒中給出的樣本值進行比較。
 
  2.應用種屬與檢測樣本種類:確保試劑盒適用于大鼠樣本,并注意不同抗凝劑處理的血清和血漿、細胞上清及細胞裂解液等樣本類型的適用性。
 
  3.檢測范圍與稀釋線性:選擇具有合適檢測范圍和良好稀釋線性的試劑盒,以確保待測樣本濃度落在標曲范圍內。
 
  4.靈敏度與變異系數(shù):高靈敏度的試劑盒適用于低濃度樣本的檢測;板間和板內變異系數(shù)(CV%)應小于10%。
 
  5.有效期:考慮試劑盒的有效期,確保在有效期內使用。
大鼠ELISA試劑盒
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